- Usando-se uma enzima de restrição, parte-se cada DNA em inúmeros fragmentos.
- Submete-se cada amostra à eletroforese e os fragmentos migram de acordo com seus comprimentos.
- Regulando-se o pH e a temperatura, as hélices do DNA se separam (desnaturação), pelo rompimento das pontes de hidrogênio.
- Os fragmentos são transferidos para uma membrana de náilon, à qual aderem, mantendo suas posições relativas.
- Junta-se à membrana uma sonda marcada com fósforo radioativo. A sonda é um líquido que contém inúmeros pedacinhos de DNA, todos exatamente iguais e desnaturados. Eles se hibridizam com setores complementares dos fragmentos de DNA dos três sangues.
- Cobre-se a membrana de náilon com uma chapa fotográfica. Nela se formam faixas correspondentes à posição assumida pelos pedacinhos da sonda (que é radioativa).
- Os padrões de faixas de duas pessoas não gêmeas diferem em muitos aspectos, porque seus genomas são distintos.
- Uma mãe (ou pai) e sua criança são consanguíneos e, portanto, apresentam padrões de faixas nitidamente mais semelhantes entre si do que pessoas não aparentadas.
- Comparam-se, então, os padrões de faixas das três pessoas. As faixas da criança foram recibidas da mãe e do pai. Se, na criança, ocorrem faixas que a mãe não tem, forçosamente elas vêm do pai verdadeiro. Se o homem testado não tiver essas faixas, ele não é o pai.
- Ao contrário, se todas as faixas inexistentes na mãe ocorrerem no homem, ele deve ser o pai.
Veja o vídeo a seguir: